熒光定量PCR的效率值

熒光定量PCR的效率值可通過標(biāo)準(zhǔn)曲線獲取。理想的反應(yīng)效率為100%。效率較高（高于110%）一般說明反應(yīng)過程中存在抑制作用。引起抑制作用的原因主要是RAN或者DNA質(zhì)量較差，模板濃度過高及含有核酸鈍化的殘余物。反應(yīng)效率較低（低于90%）的原因有試劑濃度不適（主要是引物、鎂、Taq 、 DNA、聚合酶、尤其是在多重試驗(yàn)中）。造成效率低的其他因素有引物  T  m之間的差異超過5℃或者是熱循環(huán)條件不適。抑制作用和較低的效率會影響分析的靈敏度，導(dǎo)致動態(tài)范圍減小及通用性降低。怎樣解決呢？可在做凍干時降低模板濃度，優(yōu)化工藝曲線等。試劑凍干機(jī)Pilot7-12T提供對藥品、診斷試劑、蛋白、多肽、酶、抗體、抗原等進(jìn)行凍干工藝優(yōu)化，包括保護(hù)劑篩選、凍干曲線優(yōu)化、凍干穩(wěn)定性測試、凍干生產(chǎn)工藝設(shè)計(jì)等。